Tecnologia

Cromatografia.

Diferentes TiposdeTécnicasde Cromatografia

ATécnicadeCromatografiaéMudosmétodosMaisPoderososPara aseconaçãodeuma amostra,Como Uma Mistura sintetizada ou Um Extrato BrutoBiológico,em seus组件个性化。ATécnicadesecondaçãoPORCromatografiaéAseAlnnciasentre duas duas duas duas fase:uma fasesuperfície,que se,que se,que se移动atravésda faseastacionária。

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os tipos mais ultizados de cromatografiasãoaromatografia gasosa e a cromatografialíquida。A迪伦萨埃斯塔雷卡拿达Ao estadofísicodafasemóvelnaCromatografiaEm Coluna。Na Cromatografia Gasosa,FaseMóveléUMGásQue Transporta A AmostraAtravésdeumaFaseEstacionáriaSólida,enquanto na cromatografialíquidaafasemóveléusolvente。AInteraçãodoscomostoscom a faseestacionária,um processocohecido como modo desendação,ÉcontryadaPorDiferençasdegaridadade,Tamanho Ou Afinidades deLigaçãoeficalíficas。o Modo deSeparaçãoCromatografia确定o TipodeTécnicade CromatografiaLíquida(Tabela1)。

Tabela 1。Tipos deCromatografiaLíquida
Tipos deCromatografiaLíquida Modo deSeparaçãoPorCromatografia Com Base EM:
Cromatografia deAdsorção(Cromatografia de Fase Normal E Reversa) 偏振片
Cromatografia de afinidade InteraçãoPorLigaçãoespecífica
Cromatografia por exclusão de tamanho Tamanhos分子
Cromatografia de troca de iônica 帕卡

血色素缺失症

A cromatografia de adsorção em coluna é A parte principal de um fluxo de trabalho típico de isolamento e purificação para fármacos, productos químicos, condimentos e outros。如substâncias são quimicamente sintetizadas ou extraídas de plantas, bactérias ou outros biomedical vivos。这是一种相对同心的材料,与后部的过程简单。Se a amostra for nova e desconhecida, será realizada uma seleção para condições ideais de separação por cromatografia, geralmente por cromatografia em camada delgada (TLC) ou métodos analíticos de cromatografia líquida de alta pressão (HPLC)。Uma vez enrioas condições adequate, o processo cromatográfico é elevado para a cromatografia preparation。那是准备的,或者是合成-alvo é purificado em altas quantidades, seja por cromatografia flash, HPLC prep ou uma combinação das duas。Se as técnicas form utilizadas em conjunto, a cromatografia flash será application para a etapa de pré-purificação e HPLC prep, para alcançar a alta pureza final。Após a separação bem-sucedida dos compostos, uma segunda etapa de concentração é realizada por evaporação ou liofilização。Nesse ponto, o composto está pronto para análise de sua pureza e função por outas técnicas,包括indo análise de ponto de fusão, HPLC analítica e ensaios enzimáticos。

o fluxo de trabalho propernoapósasínteseoufersçãoémostradona图1。1。

Chromatography_01_figure_ptb.tiff.
Figrua 1. o Fluxo de Trabalho dePurificaçãoMuUm Fluxo de Trabalho GeraldeFasterçãoousíntese

蓝色植物adsorção em coluna foi priira forma de cromatografia líquida, descoberta há mais de 100 anos por Mikhail Tsvet, um botânico俄罗斯-意大利,我们的加工方式cromatográfico para separar os os nas plantas。Desde então, técnica de cromatografia se desenvolveu muito rapidamente, transformado -se em um método本质应用em laboratórios de síntese e extração。

Na Cromatografia deAdsorção,AstemaçãoéControladaPelasInteraçõesDoS组件Da Amostra Com作为EstacionáriaEMóvel。Compostos Com Diferentes PropriedadesQuímicas(北极派)Apresentam Afinidades Variadas,Ou Pontos Fortes deAdesão,EmdireçãoàfaseMóvelEàfaseStacionária。AfinidadeéChopMenciadaPor Duas Propriedades Some,AdsorçãoeDessorção。Adsorçãorefere-seàpavoyidadede mudomado compounde de seAderiràfaseestacionária。一个dessorção,ou solubilidade,descreade oquãobem compounde da mistura se溶解了na fasemóvel。Velocidade Com Que OS组件Interyuais da Amostra MIGRAMAtravésdafaseStacionária依赖Das Suas Propriedades deAdsorção/dessorção,Como Mostrado Na图2。

Chromatography_02_Figure.jpg
Figura 2。Adsorcao与dessorcao

Cromatografia Flash与TécnicaDeHPLC准备

a primeirapublicaçãousandopressãoovada foilançada没有最终Dos Anos 1970 Com UmMétodoChamadoCromatografia Flash。Alémdisso,Foram Feitas Tentativas de alamanho dos sistemas de HPLCAnalíticaE,Assim,Disponibilizá-lostambémpara cromatografia predativa(HPLC Prep)。ATUMMENTE,AMUMASASTÉCNICASSãoMirmentements默多德斯(MAS Com Objetivos Diferentes)pureza)呜呜声,Condiçãodemenores电容De Carga。

Portanto, as duas técnicas de cromatografia diferem quanto ao material utilizado para a fase estacionária (tamanho de partícula diferente), à dimensão do cartucho ou coluna (diâmetro interno [DI] e comprimentos) e à vazão da fase móvel, conme mostrado na Tabela 2。

Tabela 2。Diferenças entre cromatografia flash e HPLC prep

Cromatografia闪光

HPLC准备

Tamanho das particulas

15 - 63µm

5 - 15µm

di da coluna.

12 - 115毫米

10 - 70毫米

Vazao

15 - 250毫升/分钟

5 - 100ml /min

电容De Carga.

<300克

<10 G.

PressãoMáxima.

50巴

300酒吧